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       本公司无血清培养基的制备技术通过改良基础培养基的现有成分,筛选并优化外源补充因子的组合及浓度,应用Bottom-UP法即一次一因子法,先筛选适于目的细胞生长的基础培养基,再逐个检测外源因子对细胞生长、増殖的影响,留下对细胞生长及增殖有正 效 应 作 用 的 因 子 。筛 选 实 验 包 括 单 因 素 分 析 法 、部 分 析 因 设 计 、正 交 实 验 和 P l a c kett-Burnian设计(PB设计)等。实验中,根据需要检测的因素数量选取不同的设计方法。其中,PB设计主要应用于培养基组分的筛选,通过对实验模型内的因子取两水平进行实验,比较个体差异和整体差异的关系确定关键作用因子,这种设计方法简单高效,能够避免前期筛选实验的重复及后期优化实验中的资源浪费,是培养基组分筛选中优选方法。

        优化设计是在筛选实验进行后对关键作用因子进行浓度优化的方法,主要包括最速上升法、响应面设计、全因子实验等。最速上升法通常应用于PB设计后,沿着响应值上升方向逐步逼近最优区域。而响应面设计一般将因子数控制在2-3个,利用多元线性方程建模后,分析因子的交互作用,预测达到极大值所需的条件,以期达到最优效果。响应面分析能够充分考虑到各组分间的作用,但是由于响应面设计涉及的因子数目有限,因此我们通过连续应用最速上升法和响应面设计进行因子的浓度优化。

        本公司应用成熟的筛选及优化方法,成功研制多种化学成分明确、无异源物质的无血清培养基,依据培养基技术要求进行生产工艺开发及验证,建立了完善的无血清培养基生产工艺流程并进行产业化生产。